01 影响因子｜IF:52.7
2025年4月28日，同济大学医学院，中国科学院上海有机化学研究所国家重点实验室与复旦大学基础医学院等团队共同通讯在《Signal Transduct Target Ther》发表了题为“N-deglycosylation targeting chimera (DGlyTAC): a strategy for immune checkpoint proteins inactivation by specifically removing N-glycan”的研究论文。
引用Signalway Antibody：IGF-1R Antibody#21081
摘要：
作者团队开发了一种从细胞表面目标蛋白上特异性去除 N-聚糖的新技术，名为去糖基化靶向嵌合体（DGlyTAC），它采用由肽-N-糖苷酶 F（PNGF）和目标特异性纳米抗体/亲和体（Nb/Af）融合而成的蛋白质。DGlyTAC 技术旨在针对一系列糖基化的表面蛋白，尤其是免疫检查点——CD24、CD47 和 PD-L1，对整体 N-糖基化和其他代表性膜蛋白的 N-糖基化影响极小，确保了高特异性和极小的脱靶效应。另外DGlyTAC 技术成功应用于这些免疫检查点（尤其是 PD-L1）的失活，并在癌症免疫治疗方面显示出比抑制剂更大的潜力。并且针对 PD-L1 的 DGlyTAC 在体内对多种肿瘤表现出治疗效果，甚至优于 PD-L1 抗体。
使用SAB产品关键步骤：
文中作者选择了 IGF1R 作为最初研究的生长因子受体。IGF-1 受到酪氨酸激酶受体 IGF-1R 的调节，该受体以单个多肽前体的形式合成。激活的 IGF-1R 会通过蛋白水解作用被切割成不同重量的几条链（α亚基 130 kDa和β亚基 97 kDa），从而形成一个四聚体（α-β-β-α）。每个α和β亚基分别包含 11 个和 5 个 N-糖基化位点。研究表明，当 IGF-1R 的 N-糖基化得到适当维持时，它会准确地成熟并运输到细胞表面。 一种名为 afIGF1R 的亲和体分子（Kd = 2.3 nM），它与 IGF-1R 的激素相互作用位点结合，能有效地识别各种情况下的 IGF1R-β。在不含血清的 RPMI 培养基中，通过 PNGF 或 afIGF1R-PNGF 对不同种类的癌细胞（MCF7、HepG2 和 SK-BR-3）进行 2 小时的部分去 N-糖基化处理后，用IGF1R Antibody (Signalway Antibody，Cat# 21081) ，通过免疫印迹技术，观测到条带位置变小（约 70 kDa），与对照组相比有所变化。afIGF1R-PNGF 在去除 IGF1R-β 的 N-糖基化方面比 PNGF 表现出更高的能力。
（a-c）使用Signalway Antibody(SAB)：IGF-1R Antibody，通过免疫印迹技术来检测用 PNGF 或 afIGF1R-PNGF 处理的 MCF7、HepG2 和 SK-BR-3 细胞系。
结论：
作者创造了一种新型的靶向特异性 N-糖基化消除技术，为膜蛋白失活建立了模块化策略，在肿瘤免疫治疗方面具有广泛的意义。
02 影响因子｜IF:52.7
2025年4月25日，四川大学华西口腔医院国家重点实验室，临床医学研究中心与西南医院肿瘤中心放化疗科，肿瘤内科等团队共同通讯在《Signal Transduct Target Ther》发表了题为“A20 attenuates oxidized self-DNA-mediated inflammation in acute kidney injury”的研究论文。
引用Signalway Antibody：总蛋白提取试剂盒#PE001
摘要：
团队证明了氧化自身 DNA 在 AKI(急性肾损伤) 小鼠和患者的血清中积累。这种氧化自身 DNA 通过激活 cGAS-STING 通路和 NLRP3 炎症小体加剧了 AKI 的进展。虽然抑制 STING 通路仅轻微减缓 AKI 的进展，但抑制 NLRP3 炎症小体介导的细胞焦亡显著减轻了 AKI 的进展并提高了 AKI 小鼠的存活率。随后，又发现在氧化自身DNA处理后，Tnfaip3（编码A20）显著上调。A20通过抑制STING信号通路和nlrp3介导的焦亡，显著缓解AKI的发展。此外，A20 衍生的肽（P-II）也显著减轻了氧化双链 DNA 引起的细胞焦亡，并改善了 AKI 小鼠的存活率和肾脏损伤。从机制上讲，A20 与 NEK7 竞争结合，从而抑制 NLRP3 炎症小体。A20 和 P-II 通过 NEK7 的赖氨酸 140 位点干扰 NEK7 与 NLRP3 之间的相互作用。赖氨酸 140 的突变会影响 NEK7 与 A20 和/或 NLRP3 复合物之间的相互作用。在巨噬细胞中对 NEK7 进行条件性敲除或对 NEK7 进行药物抑制，都能显著挽救 AKI 小鼠模型。
使用SAB产品关键步骤：
对于肾组织的免疫印迹分析，从肾组织中制备总蛋白裂解物，在液氮中磨碎，然后加入到总蛋白提取试剂盒（Signalway Antibody，Cat#PE001）的裂解缓冲液中。样品在4℃下以12,000 rpm离心15 min，立即收集上清。为了对细胞进行免疫印迹分析，处理后的培养细胞用裂解缓冲液裂解，裂解缓冲液与蛋白酶和磷酸酶抑制剂（Signalway Antibody， Cat#PE001）预混。
结论：
这项研究揭示了A20减轻氧化自身DNA介导的炎症反应中的新机制，并为AKI（急性肾损伤）提供了新的治疗策略。
