活细胞/死细胞染色试剂盒是采用 Calcein-AM/PI 双染细胞的方法染色活细胞和死细胞。Calcein-AM 是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，Calcein-AM 由于在Calcein的基础上加强了疏水性，因此能够轻易穿透活细胞膜。当其进入到细胞质后，酯酶会将其水解为 Calcein 留在细胞内，发出强绿色荧光。与其它同类试剂（如 BCECF-AM 和Carboxy-fluorescein diacetate）相比，Calcein-AM 是最适合作为荧光探针去染活细胞的，因为它的细胞毒性很低。Calcein 的激发和发射波长分别为 490nm 和 515 nm。Calcein, AM 仅对活细胞染色。作为核染色染料的PI 不能穿过活细胞的细胞膜，它穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核，并嵌入细胞的DNA 双螺旋从而产生红色荧光(激发：535nm，发射：617 nm)，因此PI 仅对死细胞染色。由于Calcein 和PI-DNA 都可被490 nm 激发，因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。用545 nm 激发，仅可观察到死细胞。根据以上特点，Calcein, AM 和PI 经常被结合用来作为活细胞和死细胞的双重染色。