荧光染料PKH26 是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料,可以标记活体细胞,通过与膜结构的脂质分子结合而标记细胞。对细胞毒性较小,荧光背景低,脂溶性高,能够轻易穿透细胞膜,有着强而稳定的红色荧光。
在细胞分裂增殖过程中,PKH26 的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减,标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,因此其荧光强度是亲代细胞的一半,根据这一特性,它可被用于检测细胞增殖,细胞周期的估算及细胞分裂等方面。PKH26 标记细胞的荧光非常均一,并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均一。在细胞分裂增殖过程中,PKH26 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,荧光强度变为亲代细胞的一半,通过流式细胞仪根据荧光强度的不同,可检测出未分裂细胞,分裂一次(1/2 的荧光强度),二次(1/4 的荧光强度),三次(1/8 的荧光强度),以及更多分裂次数的细胞。PKH26 可检测分裂次数多达六次甚至更多。经PKH26 标记的细胞可用于体外和体内增殖研究,且具有不会使邻近细胞染色的功能。
PKH26 标记的细胞用于体内观察可以长达数周之久,它常被用来做活体细胞检测实验和用荧光电镜观察细胞长期活动的实验。PKH26 毒性较小,不影响细胞的增殖能力。此方法操作简单,且不用放射性同位素,不存在安全隐患。可以更快速,更准确和更安全地得到想要的实验数据。
PKH26 标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞增殖检测。
PKH26 标记细胞呈红色荧光,荧光波长:λex=551 nm, λem=567 nm。