使用方法:
使用注意事项:
1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2. 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
4. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
5. Western 实验内参可以选用 beta-actin、GAPDH、Tubulin。
1. 提取液制备:每 500ul 冷的昆虫蛋白提取液中加入 2ul 蛋白酶抑制剂混合物,4ul 蛋白稳定剂,混匀后置冰
上备用。
2. 取 100mg 昆虫组织样本剪碎①,加入昆虫蛋白提取液。
3. 混匀后,在 4℃条件下振荡 15-20 分钟。
4. 在 4℃,14000rpm 条件下离心 15 分钟。
5. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到昆虫总蛋白。
6. 将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。
注:
① 用液氮研磨的方法更佳,具体方法可以联系本公司索取详细资料。
② 建议用 BCA法进行蛋白定量。
③ 蛋白样品-80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉,不要被细菌污染。