产品名称CFSE/PI双染细胞毒性检测试剂盒

1、 根据需要检测的细胞样品数，用 HBSS 将 CFSE 母液 200-4000 倍稀释，配制成 CFSE 染色工作液。不同的
细胞需要根据预实验结果确定最佳染色浓度。如果荧光强度弱，可以适当提高 CFSE 的终浓度。如果背景
太高，可以适当降低 CFSE 的终浓度，请摸索条件找到最佳浓度。
【注】:也可以用 PBS 等缓冲液或相应的无血清培养基稀释染料母液至所需浓度。开始实验前，使用 HBSS 缓冲液或培养基稀释 CFSE 到需要的工作浓度。工作浓度为根据不同细胞的预实验结果确定
的最佳工作浓度，一般染色终浓度 200-4000 倍稀释。工作液现配现用。
2、 将培养好的待测靶细胞消化后收集，用 PBS 洗涤 2 次。（400g 离心 5 分钟）
3、 将待测细胞用染色工作液重悬，至细胞浓度大约 107/ml。
4、 在 37℃培养箱中避光孵育 15-20 分钟。
5、 加 10 倍体积的含血清培养基，400g 离心 5 分钟。
6、 离心后去上清，收集细胞，用 HBSS 或无血清培养基洗涤细胞 1-2 次，最后加入培养基重悬细胞。
7、 在 37℃培养箱中孵育 20-30 分钟。