本试剂盒使用了优化的增强剂和氧化剂,提高了试剂盒的稳定性和检测灵敏度,对抗原的最低检测限可达到低飞克级。SAB极超敏(低飞克) ECL 发光液特别适用于丰度较低或痕量目的蛋白的检测,对于常规的 WB 或者丰度较高的蛋白检测请使用SAB超敏型(飞克级)ECL化学发光试剂盒#BR007.
使用方法:
使用注意事项:
ECL 工作液配制过程中发光液A 和发光液B 时务必更换吸头,工作液新鲜配制后立即使用,放置过久会影响灵敏度。
根据蛋白丰度不同曝光时间可能是数秒至数小时。
曝光时间过长会使背景加深,曝光不足会导致条带模糊。
如果曝光后条带不佳,可用洗膜缓冲液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用ECL 发光和曝光。
应使用高质量保鲜膜。
1. 使用合适的方法进行 Western,直至用 PBST 洗涤二抗。
2. 新鲜配制 ECL 工作液:试剂 A 和试剂 B 按 1:1 混合后,混合后即为 ECL 工作液。须立即使用!
3. 印迹膜蛋白面朝上,用 ECL 工作液均匀滴加至印迹膜室温孵育 1-2 分钟。ECL 工作液使用量大约为
0.125ml/cm2 膜或根据个人实验习惯使用。
4. 用平头镊夹住印迹膜,垂直置于吸水纸以吸去多余工作液。
5. 快速将印迹膜置于二层保鲜膜之间,尽量赶尽气泡。
6. 将印迹膜蛋白面朝上,放于 X 光胶片暗盒内。在暗室内放入 X 光片,曝光,显影。